The protozoan Trypanosoma cruzi has the ability to spontaneously secrete extracellular vesicles (EVs). In this paper, T. cruzi EVs derived from epimastigote forms were evaluated during interaction with triatomine bugs Rhodnius prolixus and Triatoma infestans. T. cruzi EVs were purified and artificially offered to the insects prior to infection with epimastigote forms. No effect of EVs was detected in the parasite counts in the guts of both vectors after 49-50 days. On the other hand, pre-feeding with EVs delayed parasite migration to rectum only in the gut in R. prolixus after 21-22 days. Those data suggest a possible role of T. cruzi EVs during the earlier events of infection in the invertebrate host.

A influência da nucleobase (uracila, U; citosina, C; adenina, A; guanina, G) nas propriedades físico-químicas e atividades biológicas in vitro dos complexos SbV-ribonucleosídeo foi investigada. Os complexos 1:1 Sb-U e Sb-C foram obtidos no estado sólido e caracterizados por RMN, ESI-MS e análise elementar. As constantes de estabilidade e as constantes aparentes de velocidade de formação e dissociação dos complexos 1:1 Sb-U, Sb-C e Sb-A foram determinadas. Embora o SbV se ligue através dos mesmos átomos de oxigênio das posições 2' e 3' nos diferentes nucleosídeos, as mudanças conformacionais na ribose e as propriedades físico-químicas do complexo dependem da nucleobase. A nucleobase influenciou fortemente as atividades citotóxica e leishmanicida dos complexos SbV-ribonucleosídeo. Os complexos SbV-nucleosídeos purínicos foram mais citotóxicos e eficazes contra a Leishmania chagasi do que os pirimidínicos, o que reforça o modelo de que a interação do SbV com os nucleosídeos purínicos pode mediar a atividade dos medicamentos antimoniais.

The influence of the nucleobase (uracyl, U; cytosine, C; adenine, A; guanine, G) on the physicochemical characteristics and in vitro biological activities of SbV-ribonucleoside complexes has been investigated. The 1:1 Sb-U and Sb-C complexes were characterized by NMR and ESI-MS spectroscopies and elemental analysis. The stability constant and the apparent association and dissociation rate constants of 1:1 SbV-U, SbV-C and SbV-A complexes were determined. Although SbV most probably binds via oxygen atoms to the same 2' and 3' positions in the different nucleosides, the ribose conformational changes and the physicochemical characteristics of the complex depend on the nucleobase. The nucleobase had a strong influence on the cytotoxicity against macrophages and the antileishmanial activity of the SbV-ribonucleoside complexes. The SbV-purine complexes were more cytotoxic and more effective against Leishmania chagasi than the SbV-pyrimidine complexes, supporting the model that the interaction of SbV with purine nucleosides may mediate the antileishmanial activity of pentavalent antimonial drugs.

Parâmetros de virulência na caracterização de Cepas de Entamoeba histolytica. A caracterização quanto a virulência das diferentes cepas de E. histolytica foi avaliada através de ensaios in vivo e in vitro. Discrepâncias nesta caracterização têm surgido quando se compara os diferentes ensaios. Avaliamos alguns parâmetros de virulência na caracterização de 5 cepas axênicas de E. histolytica. Estas cepas foram caracterizadas com relação à sua capacidade para induzir abscesso em fígado de hamster, eritrofagocitose e efeito citopático sobre células VERO. Encontramos correlação significante entre os ensaios biológicos in vitro, mas não entre estes com os ensaios in vivo. Boa correlação foi achada entre o efeito citopático e o número médio de eritrócitos ingeridos, mas não com a percentagem de amebas que fagocitaram eritrócitos, mostrando que grande variabilidade pode ser observada no mesmo ensaio, dependendo da variável escolhida. Não foi possível correlacionar isoenzima e padrão de fragmento de restrição com o índice de virulência desde que todas as cepas estudadas apresentaram padrão patogênico. Os resultados discordantes observados nos diferentes ensaios de virulência sugerem que a mesma não deve ser avaliada diretamente. O que de fato está sendo avaliado são as diferentes características biológicas ou funções do parasita, mais do que a própria virulência. Estas características ou funções podem estar relacionadas ou não com mecanismos patogênicos que ocorrem no desenvolvimeto de amebíase invasiva

Differences in virulence of strains of Entamoeba histolytica have long been detected by various experimental assays, both in vivo and in vitro. Discrepancies in the strains characterization have been arisen when different biological assays are compared. In order to evaluate different parameters of virulence in the strains characterization, five strains of E. histolytica, kept under axenic culture, were characterized in respect to their, capability to induce hamster liver abscess, erythrophagocytosis rate and cytopathic effect upon VERO cells. It was found significant correlation between in vitro biological assays, but not between in vivo and in vitro assays. Good correlation was found between cytopathic effect and the mean number of uptaken erythrocytes, but not with percentage of phagocytic amoebae, showing that great variability can be observed in the same assay, according to the variable chosen. It was not possible to correlate isoenzyme and restriction fragment pattern with virulence indexes since all studied strains presented pathogenic patterns. The discordant results observed in different virulence assays suggests that virulence itself may not the directly assessed. What is in fact assessed are different biological characteristics or functions of the parasite more than virulence itself. These characteristics or functions may be related or not with pathogenic mechanisms occurring in the development of invasive amoebic disease

Foi realizado um estudo comparativo da reação de imunofluorescência indireta em eluatos de sangue de cães infectados experimentalmente com diferentes tripanosomatídeos. Utilizaram-se como antigenopromastigotas de L. mexicana, L. braziliensis e L. chagasi. Os resultados mostraram que a sensibilidade do método foi de 87,5% para o diagnóstico do calazar canino, independentemente do antigeno empregado; e que ocorre reação cruzada com Leishmaniose tegumentar em 75% dos casos e com doença de Chagas em 83,3%. Levantamento epidemiológico em área de leishmaniose confirma que a reação de imunofluorescência em eluatos de sangue canino fornece reações cruzadas em cães infectados com Leishmania braziliensis e L. chagasi. Não se verificou reação cruzada pela RFC. Sugere-se a utilização da reação de imunofluorescência nas campanhas de saúde pública, mas é de se chamar a atenção para o fato de que as taxas de positividade não devem ser utilizadas como indicadores da prevalência do calazar canino.

A comparative study was made of eluates of the blood of dogs experimentally infected with different trypanosomatids. Using antigens prepared from promastigotes of Leishmania mexicana, L. braziliensis and L. chagasi, assessments were made by the indirect immunofluorescence test. The results showed a sensitivity of 87,5% in the diagnosis of canine visceral leishmaniasis, independent of antigen used. Cross-reactions occurred in 75% of cases of cutaneous leishmaniasis and 83,3% of dogs with chagas' disease. An epidemiological survey in an area of leishmaniasis confirmed that immunofluorescence tests on eluates of dogs' blood give cross-reactions between L. braziliensis and L. chagasi. The results suggest that such testing could be useful in public health campaigns but attention is drawn to thefact that the level ofpositive reactions cannot be used as an indicator of the prevalence of canine kala-azar.